细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。目前,超净工作台的广泛使用,很大程度上方便了组织细胞培养工作,并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。
细胞培养实验室应能进行六方面的工作:无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。
因此,无论是动物细胞培养室还是植物细胞培养实验室,必定有一下几种房间。
一、洗涤间
根据工作量的大小决定其大小。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机。准备洗液缸,专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。地面应耐湿并排水良好。
二、培养基配制间
配备的主要仪器设备有:冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。
三、消毒间
配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。 灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅,较大的实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。如果没有条件的话,可以将上述工作间合并成一个准备间,要求是设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风,地面要便于清洁、防滑。
四、无菌操作间
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作,所以又叫接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。室内应配有超净工作台,紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。
五、培养室
除此之外,在实验室内,还会有以下常用的基本设备。
显微镜、培养箱、干燥箱、水纯化装置、冰箱、细胞冷冻储存器、离心机、天平、消毒器、滤器、相关器皿等等。
六、植物细胞培养室
除了上期那些基本的设备以外,对于植物细胞培养实验室来说,为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室的房间不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气扇。室内温度由空调控制,光照由日光灯控制。天花板和内墙最好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺设,一般要分两间,一间光照培养室,一间暗培养室,培养室外应有一预备间或走廊。
而且,培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W,固定在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,距离在20cm,光照强度为2000-3000lx。
当然,植物培养需要辅助实验室,因此还需要鉴定室和温室。 鉴定室包括细胞学鉴定室和生化分析室。
细胞学鉴定室是为了对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥,使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系统等。
在以培养细胞产物为主要目的的实验室中,应建立相应的分析化验实验室,以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。仪器包括离心机、酶联免疫检测仪、天平、PCR仪等。
温室是用于试管苗的锻炼和移植,为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
常用设备有:温室、弥雾装置、荫棚、移栽床、钵、盆、基质等。
七、动物细胞培养室
对于动物细胞培养室来说,要保持无菌条件,因此要设置净化工作室,风淋室,传递窗,高效过滤器,洁净层流罩,生物安全柜,超净工作台,其中还要包括紫外灯,电热干燥箱,滤器,高压灭菌器。为了避免培养时出现细菌,会适当在培养液中添加抗生素,因此在培养室内要有抗生素。
为了满足动物细胞生长所需的条件,在培养室里也要设置纯水蒸馏器,纯水仪,培养板,培养瓶, CO2培养箱,培养基,血清。培养基是要根据培养的组织或细胞的类型不同而配制不同的培养基,配制时一定要加血清,而血清可以选用小牛血清。
检测细胞的仪器设备有倒置显微镜,酶标仪 ,微孔板震荡器,高速离心机,移液器,保存细胞的仪器设备是液氮罐。
细胞培养实验室还要包括实验室、准备间、缓冲间、培养室。 其中,实验室的要求有以下几点:
1.和缓冲间相连,缓冲间内备消毒服装和鞋,口罩等,入内换上。
2.设置1—2台超净工作台。
3.室内空气不流通,有适当的光线,清洁,干燥。
4.侧部可设传递窗,用于物品传递。
5.照明用荧光灯为好,消毒用紫外线灯。
6.在室内工作时,动作应轻微。
对于准备间,里面要求有大、小水槽,消毒设备,消毒后的物品和器械保藏柜,烘箱,蒸馏器(包括双蒸,三重蒸馏水),玻璃器皿,培养液,电炉等。
所以,我们可以理解为缓冲间就是上面最基本实验室设备中的消毒间,准备间就是消毒间和培养基配制间,而实验室就是无菌操作室。
八、社会价值
细胞培养实验室的社会价值在于,为实验提供基础,促进细胞培养的发展,细胞培养的好处如下:
1.直接观察活细胞的形态结构和生命活动。用于细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学等多种学科研究。
2.直接观察细胞的变化可便于摄影。
3.研究细胞种类如低等到高等到人类、胚胎到成体、正常组织到肿瘤等等。
4.便于使用各种技术:相差、荧光、电镜、组化、同位素标记等方法观察和研究细胞状况。
5.是分子生物学和基因工程学的研究对象,也是其主要的组成部分。
6.易于施用物理、化学生物的实验研究。
7.易于提供大量生物性状相似的实验对象,耗资少比较经济。
8.成为生物制品单克隆抗体生产和基因工程等的材料来源。
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细胞培养实验室应能进行六方面的工作:无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。
因此,无论是动物细胞培养室还是植物细胞培养实验室,必定有一下几种房间。
一、洗涤间
根据工作量的大小决定其大小。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机。准备洗液缸,专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。地面应耐湿并排水良好。
二、培养基配制间
配备的主要仪器设备有:冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。
三、消毒间
配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。 灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅,较大的实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。如果没有条件的话,可以将上述工作间合并成一个准备间,要求是设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风,地面要便于清洁、防滑。
四、无菌操作间
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作,所以又叫接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。室内应配有超净工作台,紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。
五、培养室
除此之外,在实验室内,还会有以下常用的基本设备。
显微镜、培养箱、干燥箱、水纯化装置、冰箱、细胞冷冻储存器、离心机、天平、消毒器、滤器、相关器皿等等。
六、植物细胞培养室
除了上期那些基本的设备以外,对于植物细胞培养实验室来说,为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室的房间不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气扇。室内温度由空调控制,光照由日光灯控制。天花板和内墙最好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺设,一般要分两间,一间光照培养室,一间暗培养室,培养室外应有一预备间或走廊。
而且,培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W,固定在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,距离在20cm,光照强度为2000-3000lx。
当然,植物培养需要辅助实验室,因此还需要鉴定室和温室。 鉴定室包括细胞学鉴定室和生化分析室。
细胞学鉴定室是为了对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥,使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系统等。
在以培养细胞产物为主要目的的实验室中,应建立相应的分析化验实验室,以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。仪器包括离心机、酶联免疫检测仪、天平、PCR仪等。
温室是用于试管苗的锻炼和移植,为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
常用设备有:温室、弥雾装置、荫棚、移栽床、钵、盆、基质等。
七、动物细胞培养室
对于动物细胞培养室来说,要保持无菌条件,因此要设置净化工作室,风淋室,传递窗,高效过滤器,洁净层流罩,生物安全柜,超净工作台,其中还要包括紫外灯,电热干燥箱,滤器,高压灭菌器。为了避免培养时出现细菌,会适当在培养液中添加抗生素,因此在培养室内要有抗生素。
为了满足动物细胞生长所需的条件,在培养室里也要设置纯水蒸馏器,纯水仪,培养板,培养瓶, CO2培养箱,培养基,血清。培养基是要根据培养的组织或细胞的类型不同而配制不同的培养基,配制时一定要加血清,而血清可以选用小牛血清。
检测细胞的仪器设备有倒置显微镜,酶标仪 ,微孔板震荡器,高速离心机,移液器,保存细胞的仪器设备是液氮罐。
细胞培养实验室还要包括实验室、准备间、缓冲间、培养室。 其中,实验室的要求有以下几点:
1.和缓冲间相连,缓冲间内备消毒服装和鞋,口罩等,入内换上。
2.设置1—2台超净工作台。
3.室内空气不流通,有适当的光线,清洁,干燥。
4.侧部可设传递窗,用于物品传递。
5.照明用荧光灯为好,消毒用紫外线灯。
6.在室内工作时,动作应轻微。
对于准备间,里面要求有大、小水槽,消毒设备,消毒后的物品和器械保藏柜,烘箱,蒸馏器(包括双蒸,三重蒸馏水),玻璃器皿,培养液,电炉等。
所以,我们可以理解为缓冲间就是上面最基本实验室设备中的消毒间,准备间就是消毒间和培养基配制间,而实验室就是无菌操作室。
八、社会价值
细胞培养实验室的社会价值在于,为实验提供基础,促进细胞培养的发展,细胞培养的好处如下:
1.直接观察活细胞的形态结构和生命活动。用于细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学等多种学科研究。
2.直接观察细胞的变化可便于摄影。
3.研究细胞种类如低等到高等到人类、胚胎到成体、正常组织到肿瘤等等。
4.便于使用各种技术:相差、荧光、电镜、组化、同位素标记等方法观察和研究细胞状况。
5.是分子生物学和基因工程学的研究对象,也是其主要的组成部分。
6.易于施用物理、化学生物的实验研究。
7.易于提供大量生物性状相似的实验对象,耗资少比较经济。
8.成为生物制品单克隆抗体生产和基因工程等的材料来源。
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