植物组培实验室是一个可以人为控制室内温湿度、光照度等条件的小型环境实验室,其构成主要包括洗涤灭菌室、准备室、培养室、无菌操作室、缓冲间等,可以满足植物组培的各种环境需求,是植物组培技术发挥作用的主要设施。
一、植物组织培养实验室的构成
组织培养实验室布局的总体要求:便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察。
一、植物组织培养实验室的构成
组织培养实验室布局的总体要求:便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察。
完整的组织培养室通常包括洗涤室、准备室(化学实验室)、接种室(无菌操作室)、培养室、细胞学实验室等部分。可以根据实际需要和条件进行设计。
但从功能上至少包括准备室(化学实验室)、接种室以及培养室三部分,并且按顺序排列,在准备室与接种室之间应留有缓冲空间(或建立缓冲室)。
二、植物组培养实验室组成
1.基本实验室
基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,是植物组织培养实验所必须具备的基本条件。
(1)准备室
功能:进行一切与实验有关的准备工作。完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。
要求:宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备,方便多人同时工作,同时要求通风条件好,便于气体交换;实验室地面应便于清洁,并应进行防滑处理。
配备的主要仪器设备有 :冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。
(2)洗涤灭菌室
功能:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。要求:洗涤灭菌室根据工作量的大小决定其大小,在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。
配备的主要仪器设备有:实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。
(3)无菌操作室
功能:主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序,是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作,所以又叫接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。
缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。
室内应配有超净工作台,紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。
(4)培养室
功能:对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养,无论是研究性实验室还是生产性实验材料进行培养的场所。
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室的房间不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气扇。室内温度由空调控制,光照由日光灯控制。天花板和内墙最好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺设,一般要分两间,一为光照培养室,一为暗培养室;培养室外应有一预备间或走廊。
培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W,固定在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,距离在20cm,光照强度为2000-3000lx。
(5)缓冲间
功能:是进入无菌室前的一个缓冲场地,减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能进入无菌室和培养室,进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。
2.辅助实验室
(1)鉴定室
细胞学鉴定室,其功能是对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥,使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系统等。
生化分析室,在以培养细胞产物为主要目的的实验室中,应建立相应的分析化验实验室,以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。
(2)温室
用于试管苗的锻炼和移植,为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。其中动物细胞培养和植物细胞培养的环境要求也有所不同。
三、植物组培养实验室的装修要求
1. 植物培养实验室设计面积,建议在10平方米左右。
2. 植物培养实验室设计面积选址,优先选择封闭性好,安静,清洁,明亮的地方,能较长时间保持无菌。
3. 地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,方便清洁和消毒。
4. 地面及内墙壁都应采用防水和耐腐蚀材料。
5. 操作室设计配置拉动门,以减少开关门时的空气扰动。
6. 操作室设计应防止空气对流,保持室内清洁。
7. 在接种室选择位置吊装1~2盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
8. 最好组培快繁无菌操作室设计一小型空调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空气对流。
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但从功能上至少包括准备室(化学实验室)、接种室以及培养室三部分,并且按顺序排列,在准备室与接种室之间应留有缓冲空间(或建立缓冲室)。
二、植物组培养实验室组成
1.基本实验室
基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,是植物组织培养实验所必须具备的基本条件。
(1)准备室
功能:进行一切与实验有关的准备工作。完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。
要求:宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备,方便多人同时工作,同时要求通风条件好,便于气体交换;实验室地面应便于清洁,并应进行防滑处理。
配备的主要仪器设备有 :冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。
(2)洗涤灭菌室
功能:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。要求:洗涤灭菌室根据工作量的大小决定其大小,在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。
配备的主要仪器设备有:实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。
(3)无菌操作室
功能:主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序,是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作,所以又叫接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。
缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。
室内应配有超净工作台,紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。
(4)培养室
功能:对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养,无论是研究性实验室还是生产性实验材料进行培养的场所。
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室的房间不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气扇。室内温度由空调控制,光照由日光灯控制。天花板和内墙最好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺设,一般要分两间,一为光照培养室,一为暗培养室;培养室外应有一预备间或走廊。
培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W,固定在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,距离在20cm,光照强度为2000-3000lx。
(5)缓冲间
功能:是进入无菌室前的一个缓冲场地,减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能进入无菌室和培养室,进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。
2.辅助实验室
(1)鉴定室
细胞学鉴定室,其功能是对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥,使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系统等。
生化分析室,在以培养细胞产物为主要目的的实验室中,应建立相应的分析化验实验室,以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。
(2)温室
用于试管苗的锻炼和移植,为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。其中动物细胞培养和植物细胞培养的环境要求也有所不同。
三、植物组培养实验室的装修要求
1. 植物培养实验室设计面积,建议在10平方米左右。
2. 植物培养实验室设计面积选址,优先选择封闭性好,安静,清洁,明亮的地方,能较长时间保持无菌。
3. 地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,方便清洁和消毒。
4. 地面及内墙壁都应采用防水和耐腐蚀材料。
5. 操作室设计配置拉动门,以减少开关门时的空气扰动。
6. 操作室设计应防止空气对流,保持室内清洁。
7. 在接种室选择位置吊装1~2盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
8. 最好组培快繁无菌操作室设计一小型空调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空气对流。
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